Читать книгу: «Лекарственные источники Тихоокеанских морей и земли Камчатки. Том 2. Том 2», страница 2

Витамин Д3, входящий в состав китового жира относится в настоящее время к одним из важных и актуальных антиопухолевых веществам. Биологически активный метаболит витамин Д3 1,25 (ОН) 2-витамин Д3, индуцирует дифференцировку только тех клеток, которые содержат достаточно большое количество его рецепторов миелолейкоз, остеогенные саркомы, нейробластомы, карциномы, эмбриональные опухоли.

После проникновения в клетку 1,25 (ОН) 2-витамина Д3 связывается в цитозоле последней со своими рецепторами и активирует их, и постепенно транслоцируется в ядро клетки, где активно взаимодействует с регуляторным участком генов и инициирует их последующую транскрипцию.

Надо иметь ввиду, что структура витамина Д3 по своей изначальной структуре типична для стероидных рецепторов (и это важно знать!), он состоит из вариабельного N-концевого домена, за которым следует консервативный ДНК-связывающий и С-концевой лиганд-связывающий домен. ДНК – связывающий домен содержит два цинковых кольца (отсюда вероятно и особая роль цинка в вопросах регулирования нашего иммунитета, особенно при его недостаточном поступлении в организм с продуктами).

Комплекс витамин Д3 с рецептором связывается затем со специфическим ГЧЭ-генов мишеней.

Для витамина Д3 это гены гормонов и белков, участвующие в кальциевом (Са) обмене, кроме витамин Д3, параттиреоидный гормон, кальцитонин, кальмодулин, кальбиндина и др., играющие не менее важную роль в регулировании обмена кальция в нашем организме.

Индуцируя повышение Са+2 внутри клетки, этим вызывается активация некоторых мембранных протеиназ, кальпаинов, которые расщепляют – протеиназу С на регуляторный и каталитический домены. Свободный католический конец протеинкиназы С не нуждается диацилглицеридах и кальции для фосфорилирования своих субстратов, таким образом активный ион Са+2 действует на внутриклеточные процессы через активированный им фермент протеиназу С.

У кита голубого тестисы достигают длина 2 1/2 фута (0,85 м), а весят около 110 футов (50 кг), они используются для получения природного тестостерона и других природных мужских половых стероидов для исследовательских целей, а также для питания спортсменов и как заменитель искусственного метадерстендиола в питании для спортсменов.

Спермацет (Spermacetum) белая восковидная масса используется в губных помадах и кольдкремах в парфюмерии, и в современной косметологии, а жидкий китовый жир, содержащий цетиловый алкоголь перерабатывают в спермацетоподобное вещество и также используют как спермацет.

Хранение жира кита: Хранят жир кита в стеклянных или пластмассовых бутылях, титановых бочках или бочках из нержавеющей стали в прохладном помещении вне естественной инсоляции для предотвращения его деградации под воздействием солнечного излучения и кислорода атмосферы (прогоркание).

Разработана современная технология обогащения жира витамином D за счет его превращения из провитамина в жире под воздействием искусственного ультрафиолетового излучения в условиях фармацевтических предприятий, в виде тонкой жировой пленки в специальных алюминиевых поддонах.

Рыбий жир, выпускаемый под названием «Полиен». Капсулы с его концентратом обладают профилактической антиканцерогенной активностью (Александров В. А., 1997).

Из кашалотового жира (не содержащего восков), получают качественные природные шампуни после перегонки жира на фракции при температуре около 210—230 градусов С и при давлении около 15—17 мм. рт. ст. фракции содержат в процентах:

стеариновую кислоту 3%;

пальмитиновую 8—12%;

мононенасыщенные кислоты С16 22—26%;

олеиновую 34—38%;

ненасыщенные С20 20—24%.

Выход суммы указанных выше фракций составляет в среднем 40%.

Нейтрализация кислот производится 50% техническим триэтаноламина содержащего 75—80% триэтаноламина и 25—20% и моно- и диэтанола. Добавляют его 120% по весу.

Триэтоламиновые мыла хорошо растворяются в воде (спирте), водных растворах, хорошо пенятся, обладая прекрасными, очищающими свойствами. Они легко эмульгируют нерастворимые соединения в воде, сворачивают жирные кислоты и воскоподобные вещества.

Рецепт (Р.№ – К-1).

Крем для рук (в процентах):

линетт N 12;

цетиловый спирт 5;

акрилдодеканол 13;

спермацет 2;

сорбитол 5;

сычужный фермент 1:100000;

n-окси бензойный метиловый эфир 0,2;

отдушка 0,5,

вода до 100.

Рецепт (Р.№ – К-2).

Крем для лица со спермацетом китовым (в процентах):

пропиленгликоль-монодистеарат 12;

жирный спирт 2;

спермацет китовый 3;

парафиновое масло (воск) 5;

дециловый эфир масляной кислоты 2;

ланолин 1

(можно заменить на жир бурого Камчатского)

сорбитол 4;

сычужный фермент 1:220000 0.2;

n- окси бензойнокислый метиловый эфир 0.2;

отдушка 0,2;

воды до 100,00

Рецепт (Р.№ – К-3)

Рецепт шампуня «Невский» на кашалотовом жире, (рекомендуемый институтом врачебной косметики для мытья жирных волос:

добавляют 12% этилового спирта 2% ализаринового масла 5%;

настойки ромашки 0,6%;

ароматизатора и необходимое количество фракций кислот жира кашалота.

Предостережение: При избыточном потреблении витамина D или продуктов его содержащих, особенно в детском возрасте возможно отравление витамин D, что будет проявляться гиперкальциемией в крови, гипокалиемией, гипокальцийурией и накоплением лимонной кислоты.

Гипрекальциемия в свою очередь ведет к нефротоксическому действию – нефрокальцинозу и отложению кальция (Са) в других органах и тканях – в эпифизарных частях трубчатых костей, миокарде, сосудистой стенке.

Отравление чаще развивается при употреблении в пищу растительных масел, обогащенных витамином D (до 50 000 ЕД. на 1 мл.), предназначенных для применения в корм домашней птице, выращиваемой на птицефабриках по интенсивным современным технологиям сельского хозяйства, в результате хищения таких продуктов и незнания их истинного составам и предназначения, или ошибочного по незнанию употребления.

Клиника отравления витамином D:

Температура тела повышается до 38—38,5 градусовС, артериальное давления возрастает до 180/100 – 230/130 мм. рт. ст., присоединяются боли в трубчатых костях, крупных суставах особенно в коленных, головные боли, боли в челюстях и даже в зубах.

Развивается поражение глаз конъюнктивит, развивается светобоязнь. Одновременно существенно поражается печень и почки,

Применяются такие методы интенсивной терапии, как гемосорбция и гемодиализ, которые оказываются достаточно эффективными.

При невозможности применяются энтеросорбция такими препаратами: Микросорб, Энтерокат-М, Энтеросорб по 3—4 столовых ложки в сутки, а детям по 1 г. на 1 кг. массы тела 3—4 раза в день.

Дополнительно назначают витамин Е, каротиноиды, баротерапия 7—10 сеансов.

Жир кита, использовался давно жителями побережий в пищу (Охотское море, Анадырское море, Берингово море).

В настоящее же время используются практически все части кита, как источник природных гормональных или гормоноподобных веществ и других биологически активных веществ.

6.27.0. КРАБ КАМЧАТСКИЙ

Paralithodes camtsschatica.

Тип: членистоногие. Artropoda.

Класс: ракообразные. Crutacea.

Отряд: десятиногие ракообразные. Decapoda.

Семейство: litodidae.

Род: paralithodes.

Синонимы: русский краб или синий краб, колючий краб или равношипий краб, краб-стригун, краб-паук и пара видов волосатых крабов, дигсрен – тибетское.

Места обитания: Краб камчатский – Paralithodes camtsschatica встречается практически во всех дальневосточных морях.

Обитает на глубинах от 4 до 270 метров и глубина его обитания меняется в зависимости от сезона года.

Распространен от полуострова Карагинского и до Туйской губы Охотского моря и до полуострова Краббе Приморье. От 45 градусов 05 секунд до 48 градусов 40 секунд северной широты.

Размещается и обитает на глубинах от 7 до 300 метров.

На больших глубинах имеются глубоководные крабы: равношипий – Lithodes acquispina, обитающий на глубинах до 830 метров (в Охотском море его нет); многошинный – Paralomis muspina на глубинах 300—1300 метров; краб Верилла -Paralomis verrili на глубинах 432—1998 метров; краб стригун – Chinoecetes anqulatus, обитающий в Охотском море на глубинах 294—2100 метров; синий краб – Paralithodes platypus, обитающий у западного всего побережья Камчатки.

В литературе описано сотни видов крабов по размеру, облику, образу жизни, окрасу и экологической эффективности его использования.

Питается краб моллюсками и морскими ежами.

Половой зрелости достигает примерно в 9—10 лет.

Пищевую ценность в крабе представляет его ходильные ноги и в особенности передние, называемые клешнями.

В Дальневосточных морях Охотском, Японском, Беринговом Тихоокеанской акватории обитает около 30 видов крабов.

В районе Камчатки и Курил промысловое значение имеет русский краб или синий, колючий или равношипий краб, краб-стригун, краб-паук и еще пара видов волосатых крабов.

Основной промысловый вид в Охотском море и его шельфе краб камчатский (КК) – Paralithodes camtsschatica – крупный представитель ракообразных, панцирь у отдельных экземпляров достигает 25 см вес до 7 кг, а размах его ног до 1.5 метра.

Самки несколько меньше самца, панцирь до 16 см. Зимует краб на глубинах 200—250 метров.

Самки икру вынашивают на брюшных ножках около года.

Летом крабы откармливаются на небольших глубинах, а к зиме откочевывают на более глубокие места. Одна самка вынашивает от 20 до 300 тысяч икринок, выживает же только около 3—4% из них.

Промысел ведут, как правило, только крабов самцов специальными ловушками, расставленными по днищу с приманкой.

Камчатского краба за год в среднем добывается около 70 тысяч тонн.

У берегов Японии иногда вылавливается краб – паук размах ног, у которого достигает 3 метров.

Еще первым открывателям Камчатской Российской земли Витусу Берингу была вручена следующая инструкция: «По берегам морским часто ходить и прилежно смотреть оных надлежит и собирать тые вещи, которые тамо из моря викидывает, сиречь травы морские, ехины, то есть ежи, зверьки, рыбы, именуемые стеллы (звезды), полины, раки, конхилия, то есть животныя, в раковинах родящиеся, сукциут, то есть бурштин кораллка. Из всех вещей оных хотя один или два обрасца соблюсти и сохранить потребает».

Камчатский краб открыт участниками первой русской пушной кругосветной экспедиции под командованием Крузенштерна в 1803—1805 г.

Таблица №КК-1

Вылов крабов в Дальневосточном рыбном регионе Российской Федерации.

(по данным 1995 г.).

Описание объекта: Краб камчатский – Paralithodes camtsschatica легко переносит колебания температур от минус 2 градусов С до плюс 18 градусов С, вместе с тем, сильно чувствителен к солености воды и обитает только в морской соленой воде с соленостью равной 32—35%о.

Размеры и масса краба камчатского – рaralithodes camtsschatica зависит от его пола, возраста и района обитания, а также наличия кормов. Как правило, самки значительно меньше самцов.

У крупных самцов панцирь в поперечнике достигает 250 мм. Охотоморские крабы имеют следующую массу: самка 830—1800, самец 1200—2400 г., а Приморские достигают 900—2200 и 1500—4200 соответственно.

Размах ходильных ног у промысловых объектов до 1 метра, при этом в обработку принимают на плавбазах с размерами панциря не менее 125 мм.

Массовый выход краба камчатского – Paralithodes camtsschatica (в %): мясо – 28; панцирь – 24,4; абдомен – 5%; печень – 5%; кровь – 2%;, жабры – 3%; икры – 9%;

Таблица № КК-2

Химический состав частей

краба камчатского – рaralithodes camtsschatica.

(в %).

Химический состав мяса у краба изменчив и зависит от биологического состояния животного: во время линьки содержание жира в мясе уменьшается, а содержание влаги увеличивается. За счет содержащихся углевода (гликогена) мясо крабов имеет сладковатый привкус.

 
Таблица № КК-3
Аминокислотный состав белков
краба камчатского.
 

/ в г на 100 г белка /.

Липиды мяса краба камчатского содержат около 19,0% неомыляемых веществ, в основном состоящих из холестерола и десмостерола. Таблица № КК-4

Групповой состав липидов краба камчатского.

(в %)

Печень и икра краба также содержит довольно много жиров. При этом жир имеет характерный рыбий запах и коричневато-зеленоватый цвет, легко при этом окисляется кислородом воздуха и высыхает, а также не содержит витамина А в отличие от других обитателей моря.

Мясо крабов содержит большое разнообразие минеральных компонентов: Таблица № КК-5

Макро- и микроэлементы краба камчатского.

Увеличенное содержание в мясе краба меди, как и других ракообразных объясняется тем, что в состав красящих веществ крови переносчиков кислорода входит не железо, как у теплокровных, а медь.

Также мясо краба содержит витамины группы А, Е, Д, С.

Таблица № КК-6

Содержание витаминов в частях тела

краба камчатского.

За счет обитания в холодных водах Крайнего Севера и близлежащих регионов Камчатки и Магаданской области, где температура воды на глубинах практически стабильная и составляет всего 4—6 градусов тепла и ниже практически круглый год краб для переработки, добываемой пищи на дне моря должен иметь мощную ферментативную систему пищеварительного тракта для разрыва белковых молекул из продуктов его пищевой цепи до элементарных аминокислот, подлежащих усвоению и в последующем идущих на построение его организма, и обеспечения его энергетических потребностей.

Из гепатопанкреаса камчатского краба получают коллагенозу камчатского краба (КК), активный протеолитический фермент, представляющий собой пористую массу со слегка коричневатым оттенком.

Коллагеназа КК обладает коллагенолитической активностью, эластолитической, трипсиновой и химотрипсиновой активностью.

Коллагеназа КК избирательно действует на коллаген соединительной ткани, вызывая его деструкцию.

Исследователями показано, что в то же время этому ферменту не подвластна живая и здоровая мышечная ткань и грануляционные ткани, а также эпителий, которые не подвергаются действию коллагеназы краба за счет выделения ими природных ингибиторов его активности.

При гнойных ранах коллагеназа КК способствует очищению последних от некротизированных тканей и гнойного экссудата, раньше, чем без применения этого фермента, в ране быстрее появляются здоровые грануляции.

Также под воздействием фермента коллагеназы КК предотвращается развитие и образование грубых рубцов (типа келоида), сохраняется подвижность кожи над мягкими тканями и сохраняется функция поврежденных суставов.

Для очищения ран любого генеза (ожоговая, гнойная, автомобильная, химическая) ампулу с ферментом вскрывают и разводят в 10 мл 0,9% раствора натрия хлорида добавляют 1 мл 2% лидокаина, затем смачивают небольшие марлевые тампоны и накладывают их аккуратно на раневую поверхность 1—2 раза в сутки.

В одной ампуле содержится коллагеназы КК около 250 ЕД со сроком годности препарата примерно 2 года.

ГЦВиБ «Вектор» в п. Кольцово Новосибирской области приступило к выпуску мази с коллагеназой КК генампикол. При её применении вместе с антибиотиками более эффективно, чем ранее применяемая мазь без такого фермента левомеколь.

Кроме того НПО «Тринита» совместно с химическим факультетом МГУ им. Ломоносова М. В. разработан ферментный препарата «моркраза» на, что получен патент РФ №2008353 от 05.08.94 г. с приоритетом от 1991 г.

Ими показано, что препарат обладает высокой фибринолитической и коллагеназолитической активностью.

In vitro на рубцовую ткань он действует более активно вместе с трипсином.

Также из гепатопанкреаса камчатского краба выделены ферменты трипсаны (КФ 3.4.21.32), которые относятся к сериновым протеазам с выходом их до 37,7% из экстрактивной фракции со степенью очистки 21. Его молекулярный вес их составляет 29 кДа. Фермент активно ингибируется при рН менее 2,5 диизопропилфторфосфатом и фенилметил-сульфонилфторидом – специфическими ингибиторами сериновых протеиназ и N-тозиллизил-хлорметилкетоном-ингибитором трипсина, а также белковыми ингибиторам, получаемым из сои и картофеля.

Фермент широко используется в биоорганической химии для изучения кинетики ферментов и изучения последовательности аминокислот белков, после гидролиза последних ферментом.

Надо отметить, что ферменты трипсаны крабов (КФ 3.4.21.32), отличаются своими свойствами от трипсинов млекопитающих (КФ 3.4.21.4) т. к. могут проявлять свою активность и при низких температурах и при довольно высоком давлении и при других особых условиях для ферментов.

Ученые их назвали карбоксипептидаза и коллагенолитическая сериновая протеаза.

Карбоксипептидаза КК имеет молекулярную массу 34 кДа, активируется ионами Со2+ и Сu2+, а ингибируется ЕДТА о-фенантролином, что говорит о том, что этот фермент относится к группе мераллокарбоксипептидаз.

В сыром панцире краба содержится от 5,4% до 17,0% хитина.

Отходы, получаемые при разделке краба используют для получения хитина, хитозана и кормовой муки, минеральных добавок и удобрений.

Химический состав кормовой муки из отходов (%): вода – 8%, жир – 2%, белок – 46%, зола – 35,0%, углеводы -9%.

Во Владивостоке в Тихоокеанском институте биоорганической химии ДО РАН из хитина краба камчатского (его панциря) получают хитозан.

Хитин краба состоит из поли-N-ацетил-D-глюклозамина, который плохо растворим. После его частичного или полного дезацелирования щелочью получают хитозан, который широко применяется в химии, медицине, сельском хозяйстве.

В 1986 г. по данным Хирано в Японии из 1 270 тонн, добытого хитина ракообразных, 1 170 тонн переработано в хитозан, 60 тонн на низкомолекулярные продукты, а 40 тонн использовано в виде нативного хитина.

В 1987 году выпуск хитина в США составил 600 тонн, а в Японии 700 тонн.

Хитозан (деацетилированный хитин) обладает широким спектром уникальных биологических активностей.

Одной их них является его способность индуцировать устойчивость к вирусным заболеваниям у растений, ингибировать вирусные инфекции в клетках животных и предотвращать развитие инфекций в зараженной культуре микроорганизмов.

Хитозан является линейным полимером, в котором остатки D-глюкозамина связаны β-1,4- связью.

Размер молекулы хитозана варьирует в широких пределах и характеризуется либо средней степенью полимеризации, либо средней молекулярной массой полимера.

При получении хитозана путем щелочного деацетилирования хитина часть аминогрупп остается ацетилированной.

Считается, что остатки N-ацетилглюкозамина случайным образом распределены по всей длине цепи полимера.

В кислой среде аминогруппы протонированых и определяют положительный заряд молекул хитозана.

Таким образом, в растворе хитозан представляет собой поликатион.

Именно такие особенности хитозана, как средняя степень его полимеризации, степень N-деацетилирования, величина положительного заряда, равно как и характер химических модификаций молекулы, являются факторами, существенно влияющими на биологическую активность хитозана.

Многими исследователями хитозана показано, что как сам хитозан, так и его производные ингибируют вирусные инфекции в различных биологических системах.

Хотя механизм противовирусной активности у него изучен на сегодня еще недостаточно.

Понятно, что анионные производные хитозана, ингибирующие ретровирусные инфекции в клетках животных, действуют иначе, чем поликатионные молекулы, влияющие на вирусные инфекции в растениях и на фаговые инфекции.

Полагают, что все механизмы такого влияния хитозана наблюдаются при взаимодействии хитозана с плазматической мембраной растительной клетки.

Результатом такого взаимодействия является усиление проницаемости и деструкции клеточной мембраны в результате неспецифического ввязывания поликатионных молекул хитозана.

Исходя из того положения, что репликация фаговой ДНК и морфогенез фаговых частиц тесно связаны с мембранами, полагают, что изменение свойств клеточных мембран под влиянием хитозана является одним из факторов, ингибирующих репродукцию бактериофагов.

Показано, что хитозан существенно модулирует функциональную активность вспомогательных клеток иммунной системы, таких как макрофаги и гранулоциты.

После подкожной имплантации хитозан вызывал хемотаксис у собак (Canis familiaris L.) и продукцию окиси азота макрофагами in vitro, а также стимулировал лейкоцитоз в периферической крови собак.

Секреция окиси азота обусловлена преимущественно остатками N-ацетилглюкозамина в молекуле хитозана, причем хитозан оказался значительно эффективнее N-ацетилманнозамина и N-ацетилгалактозамина.

При этом стимуляция хитозаном функциональной активности макрофагов может иметь значение и для подавления вирусных инфекций в организме животных, так как именно макрофаги являются антиген-презентирующими клетками, и их контакт с Т-хелперами инициирует и как бы стимулирует гуморальный и клеточный иммунный ответ.

Макрофаги выделяют медиаторы иммунного ответа, в частности, интерлейкин-1, стимулирующий пролиферацию Т-хелперов. Макрофаги также осуществляют элиминацию антигена, опсонизированного антителами.

Фагоцитируемые частицы хитина и хитоза (но не их растворимые аналоги) вызывают усиленное образование активных форм кислорода в альвеолярных макрофагах мыши (Mus musculus L.) и индуцируют продукцию γ-интерферона в культуре спленоцитов мышей линии С57ВL/6, обусловленные взаимодействием примирированных макрофагов с естественными киллерами.

А нам известно, что интерферон подавляет размножение вирусов, нарушая способность вирионных или ранних вирусных мРНК к трансляции.

Таким образом, способность хитина и хитозана индуцировать образование интерферона может являться еще одним важным фактором естественной противовирусной устойчивости.

Показано, что хитозан ингибирует размножение хламидий Chlamydia trachomatis (которые, как и вирусы, также являются облигатными внутриклеточными паразитами) в клетках HeLa, угнетая главным образом, адсорбцию паразита на клетках.

Хитозан влияет и на другие компоненты иммунной системы: вызывает хемотаксис нейтрофилов у собак, причем как прямая, так и опосредованная комплементом хемотаксическая активность прямо коррелировала с молекулярной массой хитозана и оказалась в несколько раз выше активности хитина.

Хитозан стимулирует продукцию лейкотриена В-4 и простагландина Е-2 полиморфноядерными клетками крови собаки in vitro в перитонеальном экссудате. У собак и мышей, как хитин, так и хитозан активируют систему комплемента по альтернативному пути. У мышей хитозан значительно усиливал местный и системный иммунный ответ (продукцию антител класса IgA и IgG к вирусу гриппа типа А (Teхas H1N1) и типа В (Panama) при совместном интраназальном введении с антигеном – очищенным гемагглютинином и нейраминидазой.

Сегодня синтезированы сульфопроизводные хитозана, специфически ингибирующие даже репродукцию ретровирусов.

Показано, что N-карбоксиметилхитозан-N,O-сульфат ингиби-рует синтез вирусспецифических белков и размножение вируса иммунодефицита человека HIV-1 в культуре Т-клеток и в культуре мононуклеарных клеток периферической крови человека, а также вируса мышиной лейкемии Раушера в культуре мышиных фибробластов.

Установлено, что сульфатированный N-карбоксиметилхитозан препятствует взаимодействию вирусного гликопротеида gp120 (основного белка оболочки вируса) с соответствующим рецептором на Т-лимфоцитах, ингибируя адсорбцию вируса на СD4+-клетках-мишенях, а также конкурентно ингибирует in vitro активность вирусспецифической обратной транскриптазы, препятствуя, как полагают, связыванию фермента с поли-А-олиго-dТ-матрицей. Что характерно, так как это то, что отмечается практически полное отсутствие цитотоксичности производного хитозана в отношении этих клеточных культур.

Высокой активностью отличаются производные хитозана, сульфатированные по 2 и/или 3 атому кислорода в остатке глюкозамина. Это производное хитозана эффективно ингибирует размножение HIV-1 в культуре Т-лимфоцитов человека линии МТ-4.

Полагают, что это анионное производное электростатически связывается с положительно заряженной V3-петлей в молекуле gp-120, препятствуя слиянию вирусной и клеточной мембран и такая способность анионных производных ингибировать ретровирусные инфекции в целом аналогична действию таких сульфополисахаридов, как гепарин, декстрансульфат и т. п. Таблица № КК-7